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土壤堿性木聚糖酶(S-BAX)測定試劑盒(分光光度法50T/24S)

貨號 SH0397 售價(元) 540
規(guī)格 50T/24S CAS號
  • 產品簡介
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貨號

名稱

規(guī)格

SH0397

土壤堿性木聚糖酶(S-BAX)測定試劑盒(分光光度法50T/24S)

50管/24樣

正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定                                             

測定意義:

木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產生,能催化水解木聚糖,也被稱為戊聚糖酶或半纖維素酶,可分解釀造或飼料工業(yè)中的原料細胞壁以及β-葡聚糖,降低釀造中物料的粘度,促進有效物質的釋放,以及降低飼料中的非淀粉多糖,促進營養(yǎng)物質的吸收利用,因而廣泛的應用于釀造和飼料工業(yè)中,BAX一般分離自最適生長pH9 -11的微生物。

測定原理:

BAX在堿性環(huán)境中催化木聚糖降解成還原性寡糖和單糖,在沸水浴條件下進一步與3,5-二硝基水楊酸發(fā)生顯色反應,在540nm處有特征吸收峰,反應液顏色的深淺與酶解產生的還原糖量成正比,通過測定反應液在540nm吸光值增加速率,可計算BAX活力。

組成:

產品名稱

SH0397-50T/24S

Storage

緩沖液:液體

20ml

4℃

試劑一:液體

5ml

4℃避光

試劑二:液體

25ml

4℃避光

說明書

一份

自備儀器和用品:

天平、常溫離心機、震蕩儀、恒溫水浴鍋,可見分光光度計、1 ml玻璃比色皿。

樣品處理:

新鮮土樣風干,過30-50目篩。

測定操作表:

 

對照管

測定管

土樣(g

0.1

0.1

緩沖液(μl

600

400

試劑一(μl

 

200

混勻,50℃震蕩反應30min,立即90℃水浴10min,8000g25℃離心10min,取上清500μl

試劑二(μl

500

500

混勻,90水浴中顯色5min,1ml玻璃比色皿,對照管調零,測定A540。

S-BAX計算公式:

標準曲線:y = 2.8432x - 0.0293,R2 = 0.9985

酶活定義:50℃,pH9.0條件下,每克土壤每天分解木聚糖產生1μmol 還原糖所需的酶量為一個酶活單位。

S-BAX活力(μmol/d/g 土樣)=A540+0.0293÷ 2.8432×V反總×103÷ W÷T÷ 150

                        = 67.53×A540+0.0293÷ W

V反總:反應總體積,0.6mlT:反應時間,1/48d;10001mmol/L =103μmol/L150:木糖分子量。

注意事項:

1. 保證震蕩反應30min,使酶與底物充分接觸。

2. 注意90℃水浴防止爆開,以免改變反應體系。